Molekulare Diagnostik

Unser Auftrag

Im molekularbiologischen Labor steht die gesamte Bandbreite der modernen Nukleinsäureanalytik sowohl den Forschungsprojekten des Instituts als auch der Patientendiagnostik bei speziellen Fragestellungen zur Verfügung. Die methodische Expertise des molekularbiologischen Labors umfasst:

• Standard und Real-Time PCR-Verfahren
• PCR-basierte SNP Typisierung
• automatische DNA-Sequenzierung und -Fragmentanalyse
• Microarray-basiertes RNA-Profiling
• Standard Proteinanalytik (Westernblot, ELISA, FACS)

Molekulare Blutgruppendiagnostik

• ABO: Standard Genotypisierung (PCR-basierte Bestimmung der häufigsten Allele); Subtypisierung (PCR-basierte Bestimmung der häufigsten Allele auf 36 Genvarianten); vollständige Gensequenzierung
• RHD: PCR-basierte Bestimmung der häufigsten D-Kategorien und Dweak-Allele
• RHCE: PCR-basierte Bestimmung des CcEe Genotyps sowie von Genvarianten; vollständige Gensequenzierung
• PCR-basierte Bestimmung des Genotyps weiterer Blutgruppenmerkmale: MNS, Kell, Kidd, Duffy, Colton, Dombrock, Sekretorstatus

Abstammungsgutachten

Abstammungsgutachten werden erstellt, um Vaterschaften bei Unterhaltsfragen oder ungeklärte Verwandschaftsverhältnisse abzuklären. Die Gutachten werden seit 2002 gemäß den aktuellen Richtlinien durchgeführt und sind gerichtlich anerkannt.

Prof. Dr. med. Harald Klüter ist Mitglied der Arbeitsgemeinschaft der Sachverständigen für Abstammungsgutachten. Die Abteilung molekularbiologische Diagnostik unter der Leitung von Prof. Dr. rer. nat. Peter Bugert ist außerdem seit 2005 nach DIN ISO 15189 akkreditiert und nach DIN ISO 9001 zertifiziert. Diese Zertifizierung beinhaltet auch den Bereich „Erstellung von Abstammungsgutachten“. Die Zuverlässigkeit und Qualität der erstellten Gutachten sind durch regelmäßige Teilnahme an nationalen und internationalen Ringversuchen gewährleistet.

Die Labormethoden:

1. Blutgruppenanalyse: Bei den Blutgruppen handelt es sich um bestimmte Merkmale der roten Blutkörperchen (Erythrozyten). Unter Verwendung klassischer (serologischer) Methoden werden die ABO Blutgruppenmerkmale bestimmt. Zusätzlich werden die wichtigsten Merkmale im ABO-Gen mit Hilfe molekulargenetischer Methoden analysiert.
2. Molekulargenetische Bestimmung der Gewebemerkmale HLA-A und HLA-B: Von den Genen HLA-A und HLA-B kennt man zahlreiche Varianten, die mittels molekular-genetischer Methoden bestimmt werden können. Da diese Varianten sowohl mütterlich als auch väterlich vererbt werden, kann die Bestimmung der Genvarianten zur Abstammungsbeurteilung herangezogen werden.
3. STR-Analyse: Die STR ('short tandem repeat' = kurze direkte Sequenzwiederholung) Analyse ist ebenfalls eine molekulargenetische Untersuchungsmethode. Hierbei werden sogenannte anonyme genetische Merkmale bestimmt, also Merkmale, die sich nicht innerhalb funktioneller Gene befinden, die aber dennoch sowohl mütterlich als auch väterlich vererbt werden. Grundlegende Analysemethode ist die PCR ('polymerase chain reaction' = Polymerasekettenreaktion) mit Hilfe derer die zu untersuchenden DNA-Abschnitte gezielt angereichert werden. Die Produkte aus den PCR-Reaktionen werden unter Verwendung eines automatischen Analysegeräts sichtbar gemacht. An jedem der bis zu 19 untersuchten DNA-Abschnitte ist ein Muster zu erkennen, das im direkten Vergleich von Kind, Mutter und fraglichem Vater Übereinstimmungen oder Unterschiede erkennen lässt.